Набор тетрадотоксина TTX ELISA с высокой чувствительностью прост в обработке и занимает мало времени

Подготовка реагентов

• Экстракционный растворитель

Состав экстракционного растворителя следующий: метанол:дистиллированная вода:ледяная уксусная кислота = 400:599:1; например, метанол 40 мл + дистиллированная вода 59,9 мл + ледяная уксусная кислота 0,1 мл

• 1×разбавитель образца

Смешайте 1 объем 4×разбавителя образца с 3 объемами дистиллированной воды.

Рыба-фугу(мышцы, печень, кожа)

• Гомогенизируйте необходимое количество образца с помощью подходящего миксера.
• Взвесьте 2 г гомогенизированного образца в подходящий флакон и тщательно перемешайте с 10 мл экстракционного растворителя.
• Выдерживайте флакон в водяной бане при температуре 90℃ в течение 10 минут и в течение этой процедуры встряхивайте флакон 3 раза.
• Промойте флакон в течение 1 минуты водопроводной водой, чтобы охладить образец, а затем добавьте 1 мл гексана, перемешивайте на вортексе в течение 30 секунд;
• Центрифугируйте образец при 4000×g в течение 5 минут, пипетируйте 100μL межслойной жидкости и добавьте 300μL 1×разбавителя образца
• Используйте 50μL раствора образца на лунку для анализа.

Примечание: Коэффициент разбавления:20